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2024赛季MLS共有29支球队参赛，分为东部联盟和西部联盟两个赛区。2025赛季将继续扩军至30支球队，圣迭戈FC将作为新成员加入西部赛区。每支球队常规赛需进行34场比赛。

MLS常规赛通常从每年2月下旬开始，到10月中旬结束。比赛时间多安排在北京时间上午7:00-11:00之间，非常适合国内球迷观看。季后赛从10月下旬开始，MLS杯总决赛一般在12月初举行。

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MLS采用美国体育特有的赛制，没有升降级制度，通过选秀和扩军增加球队。比赛规则与国际足联标准一致，但设有工资帽制度限制球队支出。近年来随着梅西等巨星加盟，MLS关注度和竞技水平大幅提升。

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MLS季后赛采用单场淘汰制，东西部各前9名球队晋级。首轮为单场定胜负（高种子主场），之后为三轮系列赛（主客场两回合）。东西部冠军在中立场地进行MLS杯总决赛，一场定冠军。